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ABPAP法操作步骤

发布日期:2013-03-08  浏览次数:20

  ABPAP法操作步骤

  (1)4/lm石蜡切片58℃烤片4h,切片常规脱蜡至水,PBS洗3rain×3次。

  (2)蛋白酶消化或AR(组织抗原的暴露或抗原的修复,此步视情况而定)。

  (3)0。3%H:02处理切片20min(室温),PBS洗3min×2次。37℃60min),PBS洗3min×3次。

  (6)滴加桥抗体(二抗),37℃孵育30rain,PBS洗3min×3次。

  (7)适当稀释的PAP复合物(要求与特异性一抗同一种属)37℃孵育30min。

  (8)PBS洗3minX3次。

  (9)适当稀释的生物素化羊抗兔或抗鼠二抗(根据PAP复合物种属而选择不同的二抗)37~C孵育30min,PBS洗3rain×3次。

  (10)适当稀释ABC复合物37℃孵育30rain,PBS洗3min×3次。

  (11)0.04%DAB-0.03%H202显色8~12rain。

  (12)水洗、复染、脱水、树胶封片,观察结果。

  注:根据具体情况可省略(2)、(3)步骤。

  本文分享自上海亨代劳生物有限公司,如有转载请注明出处。

 
 
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